白菜胚体愈伤组织怎么做原生质体？

选择生长健康、无病害的白菜植株。70%乙醇、次氯酸钠等，用于表面消毒植物材料。

制备白菜的愈伤组织原生质体通常涉及一系列步骤，主要包括表面消毒、愈伤组织的培养和酶解等过程。以下是一个一般的操作流程：

 

 

材料准备：

 

1. 白菜胚体： 

 

选择生长健康、无病害的白菜植株。

 

2. 表面消毒剂： 

 

70%乙醇、次氯酸钠等，用于表面消毒植物材料。

 

3. 培养基： 

 

含有植物生长激素的培养基，如Murashige and Skoog培养基（MS培养基）。

 

4. 愈伤组织培养条件： 

 

具体培养条件根据实验设计和白菜品种而定。

 

5. 酶液： 

 

植物酶解酶、纤维素酶等，用于酶解植物细胞壁，释放原生质体。

 

6. 实验室用具： 

 

显微镜、吸管、移液器、培养皿、滤纸等。

 

 

步骤：

 

1. 表面消毒：

 

   将白菜胚体在流动水下清洗，去除表面的尘土。

 

   将白菜胚体浸泡在70%乙醇或次氯酸钠等表面消毒剂中，进行表面消毒。消毒时间通常在几分钟到十几分钟之间，具体取决于消毒剂的浓度和植物材料的特性。

 

2. 剪切和培养：

 

   将表面消毒后的白菜胚体剪成小段。

 

   将这些小段培养在含有植物生长激素的培养基中，提供适当的温度和光照条件。培养时间根据实验设计和研究目的而定，通常是数天到数周。

 

3. 收获愈伤组织：

 

   当愈伤组织形成并达到适当的大小时，收获愈伤组织用于后续的实验。

 

4. 酶解和原生质体制备：

 

   将收获的愈伤组织放入含有植物酶解酶、纤维素酶等的酶液中，进行酶解。酶解时间和温度根据实验需求而定，通常需要在无菌条件下进行操作。

 

   过滤酶解后的混合物，获取含有原生质体的悬浮液。

 

5. 培养原生质体：

 

   将原生质体悬浮液接种到含有植物生长激素的培养基中，提供适当的生长条件。

 

这是一个一般性的步骤概述，具体的实验条件和步骤可能因实验目的、植物品种和培养条件的不同而有所不同。在进行实验之前，请确保阅读相关的文献和方法论，以了解适用于您研究的特定条件。同时，进行实验时，严格遵循无菌技术，以防止外部微生物的污染。