日本圆叶海棠的组培快繁技术

日本圆叶海棠(MalusprunifoliaBorkhvar．ringoAsami)，别名丸叶海棠，是日本培育苹果苗木中广泛应用的一种基砧，其显著特点是扦插繁育能力强，扦插成活率可达90％以上。经过组培脱毒的圆叶海棠生长量大，抗逆性强，嫁接亲和性好，具有更稳定的生长势，用圆叶海棠扦插繁殖取代实生播种繁殖是苹果育苗中的一次革命。本文建立的Et本圆叶海棠快繁体系，可在短期内获得大量无毒无性系砧木，实现周年生产，满足苹果苗木生产对砧木的需求。1培养条件①诱导培养基：MS+6-BA0．3mg／L+NAA0．03mg／L；②增殖培养基：MS+6-BA0．2mg／L+NAA0．02mg／L；③壮苗培养基：MS+6-BA0。1mg／L+NAA0．02mg／L；④生根培养基：1／2MS+IBA0．1mg／L+IAA0．2mg／L。前3种培养基均加蔗糖35g／L，生根培养基蔗糖为23g/L，pH值5．8，培养温度为25。t2，光照强度为1500～2000Lx，光照时间为14小时／天。2生长与分化情况2．1无菌材料的处理选取日本圆叶海棠春季萌发抽生的新梢茎尖或带腋芽的茎段，剪成长3～5cm的茎段置于三角瓶中，先用少许洗衣粉浸洗2～3分钟，然后用自来水冲洗到没有泡沫为止，在超净工作台上，用0．1％HgCl：消毒8分钟，再用无菌水淋洗5～6次，滤纸吸干水分，剪成长1～2cm的单芽茎段或带几个较小叶片的茎尖，接种于诱导培养基上。2．2不定芽的分化及丛生芽增殖芽在诱导培养基上培养20天后开始萌动，伸长成无菌苗。在无菌条件下，将上述伸长苗再切段，每段1～2个芽，接人增殖培养基中，30天后可产生大量丛生芽，将丛生芽再切段，接种在相同培养基上继代培养。增殖系数为7～8。2．3壮苗培养在增殖培养基中，获得大量的丛生芽，但芽分化较多，植株生长较细弱，因此，将经过继代增殖的小植株，在生根前接种在壮苗培养基中，进行壮苗培养，获得健壮的无根试管苗。2．4诱导生根及移栽取株高2．5～3cm小苗接种到生根培养基上培养2周左右，生根率达98％。然后在调控温室驯化生根20天，当试管苗根长2～3cm、茎干微呈红色、叶大而浓绿时，开口练苗3天，然后用镊子夹出试管苗，栽入已配好营养土(珍珠岩、麦茬土和河沙按l：2：1混合)的六棱型营养钵中，用0．1％多菌灵消毒后，保持80％的湿度，两周后开始长出新根和新叶，成活率达86％。当长出2～4片真叶时开始移人大田，成活率达98％。