灵芝菌种分离前要做哪些准备?
灵芝的子实体在适宜的条件下能生长出菌丝的特性,在采集灵芝菌种后,应根据采集的目的要求选择优良的个体进行分离,保持其原菌种的优良品质。近期有栽培灵芝的网友咨询想种菜:灵芝菌种分离前要做哪些准备?灵芝菌种分离前的准备工作有哪些?以下想种菜网就做简单介绍,供网友们参考。
准备一、无菌室和分离用器具的灭菌和消毒
分离菌种的操作过程,应该在很清洁的条件下严格按照无菌操作技术进行,无菌室、无菌箱或洁净工作台都应保持清洁,必要时可用0.1%的升汞溶液或70%的乙醇擦拭工作台。微生物一般都是附着在尘埃上、悬浮于空气中,可在室内喷雾或煮沸沸水的方法,使空气中水汽饱和,尘埃与水滴同时降落,除去空气中的微生物。分离时所用的培养皿、刀剪、接种铲等用具及工作人员的工作服都应进行无菌处理,操作时不能在操作间走动,防止带来杂菌。
准备二、消毒液的配制
①无菌水。无菌水即为高压灭菌后的自来水。将适量的自来水装入三角瓶中,塞好棉塞,然后进行高压灭菌,装入水量不宜太多,防止高压灭菌时弄湿棉塞。无菌水不应保存时间太久,防止污染。
②常用的消毒液。0.1%升汞溶液、漂白粉、70%的酒精溶液。此外,5%福尔马林、3%过氧化氢、2%高锰酸钾等都可用做表面消毒,处理时间和浓度因材料不同而异,处理后都应用无菌水冲洗。
③排除细菌污染。细菌污染是分离真菌的大敌,目前抑制细菌生长有效的方法是在培养基中加入适当的抗生素。加金霉素(30微克/毫升)可抑制多数细菌生长,加青霉素(2微克/毫升)可抑制革兰氏阳性细菌生长,加多黏菌素B(0.5微克/毫升)可抑制革兰氏阴性细菌生长,加链霉素40微克/毫升和氯霉素50微克/毫升可以抑制大部分细菌生长,除氯霉素可在制作培养基时灭菌前加入外,其他抗生素都应在培养基灭菌后冷却到45℃左右时再加入。此外,可调节培养基的pH,酸性培养基对大部分细菌都有抑制作用,而并不影响真菌生长。
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