食用菌母种的制作新方法
一、食用菌菌种瓶的选择
用100毫升医用盐水瓶代替试管作盛装培养基的容器。
二、培养基的配制
1.配方:马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂18~20克,水1000毫升。
2.制作:马铃薯挖去芽眼,去皮洗净,切成薄片后加水,在铝锅中煮沸25~30分钟,用4层纱布过滤,取滤液放入铝锅中,加入琼脂,小火加热并不断搅拌,待琼脂溶化后加入葡萄糖,加开水补足1000毫升,搅匀,趁热装入盐水瓶中,每瓶装8~10毫升,塞上棉塞 棉塞要求干燥、松紧、长度合适 ,再用牛皮纸包住棉塞及瓶口部分,用胶圈扎紧瓶口。
三、灭菌
采用高压灭菌,若没有专用高压锅,可用家用高压锅进行灭菌。方法是:将装好培养基的菌种瓶放置在高压锅中,瓶间留有空隙,不可堆放过紧,以利蒸汽循环,灭菌彻底。当压力表指针指到0.05时,打开放气阀,集中排出冷空气,使压力降到零时,关闭排气阀进行升压灭菌,自动放气后保持30分钟 家用普通高压锅灭菌1.5小时 ,让其自然冷却,取出放置在接种箱中备用。
四、菌种分离
主要采用组织分离法。通常是从食用菌子实体内部分离纯菌种,操作时,从子实体内切取一小块组织,放在培养基中培养可长出纯菌种,且菌丝萌发快,遗传性状稳定,后代不易发生变异。
1.种菇消毒:种菇采下后,切去菌柄,放入洗净的盘内,在装有紫外灯的接种箱内照射20~30分钟。
2.接种块切取:在已消毒的接种箱内,撕开子实体,用经酒精灯火焰杀菌冷却的小刀,在菌柄与菌盖交接处内部切取黄豆大小组织块,放入菌种瓶内培养基上培养。
3.接种块选择部位:接种块选择部位因食用菌种类不同而异,菇体肥厚的种菇,在菌盖外缘菌盖皮和菌褶交接处切取组织块进行分离。
菌体小、盖薄、柄空的菌类 如金针菇 ,应快速击掉菌盖,用接种针钩取菌柄顶端生长点组织进行分离。
菌肉极薄菌柄中空孢子不易萌发的伞菌类,可采用子实层分离法,选取半破膜的子实体,移入培养基上,菌丝萌发后即转入新的培养基上。对子实体较大、质地结实的多孔菌类,应取子实体外缘菌肉组织块。
含水量低的子实体切取5平方厘米的小块,在酒精灯火焰上烘烤5~10秒钟,使子实体表现微焦,然后用无菌刀切取菌肉组织一小块,移入培养基上。
五、培养及管理
将放入组织块的菌种瓶竖放在室内架上或平台上,室内温度控制在20~28℃,经过1~2天组织块萌发。菌丝生长期间注意观察。发现污染及时挑出,经过10天左右菌丝长满瓶,母种制作成功。