红掌、凤梨的种苗工厂化微繁技术

    针对目前国内红掌和凤梨种苗主要依赖进口的现实问题，本文就引进市场上热销的颇有潜力的红掌和观赏凤梨品种，采用现代植物组织培养技术和温室大棚栽培技术，研究开发和推广质优价廉的组培苗，希望对国内同行有一定的参考价值。    一、引进名优品种    在国内外市场上畅销的名优品种，如亚利桑娜、热情、情人红、粉冠军等红掌，以及吉利红星、丹尼斯等凤梨。引进的主要形式是母株外殖体。    二、无菌系建立和维持    根据课题设计的技术路线，一方面从植株采取幼嫩茎段或芽段，进行常规消毒后，接种到培养基上；另一方面，采取幼嫩叶片，进行常规消毒后，接种到诱导培养基上。    茎段或芽段的消毒方法：取嫩的茎段或芽段在自来水中冲洗10分钟，放进无菌水中浸泡30秒钟，用0.1%灭菌消毒15秒钟，用无菌水冲洗2次后放进70%酒精泡30秒钟，再用0.1%的升汞浸泡20分钟，最后用无菌水冲洗3次，可以在超净台上进行接种。    叶片消毒方法：取嫩叶用70%的酒精擦拭表面，接着在无菌水中洗2分钟，把叶片切成1平方厘米，放进加有1～2滴吐温80的1%NaOCI溶液浸泡30秒，放在超净台上用无菌水；中洗3～4次，就可以接种。    结果表明，在茎段培养方面没有取得突破性进展，主要问题在于不能彻底消毒。若消毒时间不够，接种材料很快污染；消毒时间过长，则往往会将材料杀死；有时候，一些材料在初代接种时既没有污染，也没有死亡，但往往在转瓶继代培养时又出现污染。这种污染往往是由内生细菌污染引起。    叶片培养途径的成功率高，可达80～90%以上。但是，这种方法所需要的时间也较长，叶片培养完成脱分化和再分化的时间少则半年，多则一年以上；而且，叶片培养对培养基的要求也较为苛刻，期间需要不断调整培养基。筛选出一些主要品种叶片培养途径所需的培养基配方，成功地获得了无菌种芽。    三、工厂化生产红掌和凤梨组培苗    经过多次试验，最终筛选出适合的增殖和生根培养基（表2），红掌继代培养的时间为40～45天，凤梨继代培养的时间为50～60天，具体还需要观察增殖芽的长势情况；培养的条件为温度为25～30℃，光照强度为1500～2500LUX，每天人工光照14～16小时；接种时除了控制降低污染率外，还要注意到在切割时凤梨的生长点较低，不要切掉生长点，同时要去掉老的愈伤组织。    从培养基的筛选、培养条件的控制、切割方法的试验，使增殖率MR值为2.5（红掌）和3.0（丹尼斯凤梨），生根率达到98%以上。实现了工厂化生产，建立起工厂化快繁体系。依托该体系，可以使1瓶无菌种芽在10个月时间内扩增到1000瓶以上。    在组培过程中，必须注意控制种芽的增殖代数，通常在18代以下，这样既可以保证质量和数量要求，也为后续种芽的开发提供了充裕的时间。同时，为保证种芽质量，降低污染率项目组还配备有专门的质检人员加强管理，从水质的检测、培养基配制、人工切割、环境条件的控制一直到培养空间的消毒均采取一系列有效的措施，及时发现和处理不正常的种芽，如玻璃苗、花叶、皱叶等。    四、组培苗的培育和驯化    当组培苗在培养瓶中生长成为完整的植株后，经过一段时期的炼苗，则需要将瓶苗取出来，清洗干净，消毒，移栽到栽培基质中，再经过一段时期的培育，达到一定的规格以后，方可作为成品种苗销售。    在组培苗的培育和驯化的各个阶段，应制订严格的操作规程，由花棚专门的栽培技术人员执行。首先组培苗出瓶时要严格地消毒，方法是将健壮无污染的组培苗小心取出用清水洗）争残余的培养基，放入1000倍50%的多菌灵溶液中浸30秒后即可；栽培用的基质是由泥炭、珍珠岩和椰糠等按照一定的比例调配而成，经过消毒处理后备用；红掌组培苗的移基质为泥炭土∶珍珠岩=6∶1，凤梨组培苗移栽基质为泥炭：珍珠岩∶椰糠=4∶1∶3；培养的条件是温度控制在自天25～30℃，夜晚20～25℃，湿度60～80%，光线强度在8000～15000LUX为佳，温度低于。15℃或高于33℃时容易受到伤害（红掌组培苗比凤梨组培苗更容易受到伤害）；因组培苗比较娇嫩易受病菌的感染，移栽的环境和所用的工具、用具都必须清洗干净，经过高锰酸钾溶液漂洗消毒以后方可使用。结果表明，红掌和凤梨组培苗的移栽成活率达到98%以上，组培苗3～4厘米经过50～60天的培养即可以达到出货的标准。