猪附红细胞体病并发沙门氏菌感染的诊治

    1 发病情况    我省石阡县本庄镇河坝村养猪户张某，饲有育肥猪78头，在其饲养条件、管理方式未发生任何改变的情况下，猪群突然发生无名高热，体温达40.8～42.0℃，稽留不退。几天后，猪的耳、鼻、腹下、臀部及四肢末端皮肤均出现紫褐色，指压不褪色；病猪呼吸困难，咳嗽，喘粗气，精神沉郁，食欲降低，死前喜欢饮用脏水，鼻腔内流出浓稠的白色液体；发病初期有便秘现象，后期出现腹泻；75kg左右的病猪，少数有呕吐现象¨临死前个别猪有神经症状，且抽搐而死。先以50kg左右的猪发病为主，后以20～40kg左右的猪发病为主。发病6天以来，死亡12头，死亡率为15.4%。    2 病理剖检    死猪胸腔内有大量的积液；肝脏肿大、出血；脾脏发黑且出血；淋巴结肿大；十二指肠、大肠及回盲瓣黏膜面有多量的纽扣状溃疡和黑红色斑点，且表面附有假膜；下颌淋巴结肿大、充血；肺肿大，其间质增宽，且有片状瘀血，切开有泡沫状的液体流出；肾脏瘀血、肿大，个别猪发生肾脏萎缩。    3 诊 断    在发病2～6天中，畜主请当地兽医作过诊治，用药（青霉素、链霉素及磺胺类）后稍有好转，但停药后第二天病情又加重。曾怀疑是猪瘟，为了有效地控制疫情，及时弄清发病原因，立即采集病料（血液、十二指肠、大肠、肺、脾、肾）到我校作实验室诊断。    3.1 直接免疫荧光抗体试验 方法：把畜主送检的肾脏修剪成0.5～1.0平方厘米的小块，将其放置于滤纸上把组织液吸干后，在洁净的载玻片上作3～5张触片，经冷风吹干后，将其置于冷丙酮中固定15分钟后取出，在触片表面滴加猪瘟荧光抗体覆盖，然后把玻片放在湿盒内于37℃恒温培养箱中让其作用40分钟后，将玻片表面的荧光抗体倒掉，再于涂面上滴加0.1%伊文思兰染液复染10分钟，最后用PBS液（pH7.2，0.01 mol/L）洗涤3～5次，于冷风处吹干，再用碳酸盐甘油缓冲液封固盖玻片，马上在荧光显微镜下进行观察。结果：经认真仔细的观察未发现猪瘟荧光阳性细胞。    3.2 血液镜检 方法：取少量凝固不良的血液于洁净载玻片上，加盖盖玻片，将其制成血液压片，置于物镜为100倍的油镜下仔细观察。结果：发现红细胞表面附着有多量的球形、月牙形或卵圆形的小体，使整个红细胞呈典型的星芒状或波萝状；几乎见不到正常的红细胞，且红细胞与小体的结合物呈现出不规则的主动运动。由此诊断为猪附红细胞体阳性。    3.3 细菌学检查 方法：无菌操作，用病变肺脏组织触片后作革兰氏染色及瑞氏染色。同时，将病料接种于SS琼脂和麦康凯琼脂平板上，于37℃培养24小时。结果：发现革兰氏阴性杆菌，菌体两端钝圆，中等大小，呈不规则的散在排列。SS平板上细菌生长茂盛，菌落细小，直径0.8～2mm，微黄色，透明，正圆形，稍隆起，边缘整齐，湿润；培养48小时后有的菌落中心呈黑色。麦康凯琼脂上细菌长势较好，菌落细小，直径1～3mm，五色，粘稠，不透明，正圆形，稍隆起，边缘整齐，湿润。取SS平板上具有典型特征的独立菌落进一步分离纯化；同时作成涂片，经革兰氏染色，结果为革兰氏阴性杆菌，菌体两端钝圆，中等大小，呈不规则的散在排列。    3.4 凝集试验 方法：取分离纯化后具有典型特征的独立菌落与沙门氏菌属诊断血清（由兰州生物制品研究所生产）作平板凝集试验。结果：出现明显的块状凝集现象，说明所分离纯化的细菌为沙门氏菌属杆菌。    3.5 药敏实验方法：用纸片扩散法（试验药片由上海伊华医学科技有限公司生产）。取SS平板上具有典型特征的独立菌落密集接种于普通翻旨平板上作药敏试验。结果：该细菌对青霉素、链霉素、卡那霉素、庆大霉素、氟哌酸均不敏感；而对头孢噻肟、丁胺卡那敏感，其抑菌圈直径为2.0～2.5cm。    根据该猪场猪群发病季节（6月）、发病年龄（不分大小）、发病情况及临床特点、剖检特征，同时结合实验室多项诊断的结果。判定此猪场猪群发病是猪附红细胞体与沙门氏菌混合感染所致。    4 预防与治疗    4.1 将该猪场发病猪与健康猪立即分开隔离饲养，对整个猪场进行彻底消毒，加强饲料、饮水和环境卫生管理，驱除体内外寄生虫。对病情特别严重者及时淘汰并进行无害化处理。    4.2 病情较轻者，用附红散及土霉素混饲。土霉素按 600mg/t饲料添加，附红散按说明进行添加。    4.3 对病情较重者，口服土霉素（按50mg/kg体重计算，分两次内服）；同时肌肉注射血统（葡聚糖铁）3～5ml/头，连用 3天；并用阿米卡星（丁胺卡那）按40mg/kg饲料计量混饲。    经过以上防治方法的及时实施，5天后该猪场疫情基本得到控制。    5 讨论与小结    5.1 该猪场此次发生疫情的主要原因是平时疏于科学的严格管理。据了解，该猪场自猪群进场以来只作过猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联苗的预防注射，除此之外未作过其他任何免疫接种，而且猪场周围卫生环境又比较差。更重要的是近期气候炎热，暴雨、高温交替不断的情况下没有作好相应的防范措施，最终导致猪群发病。因此，养殖场在经营管理方面，建立一套切合自身实际的科学有效的免疫及消毒程序也是一件刻不容缓的工作。    5.2 猪群发病初期未能作出及时的诊断，以致盲目治疗，收效甚微，错过了治疗的最佳时期，从而给猪场带来较大的经济损失。根据多方面调查了解，此次该场发病猪在临床特征上没有明显的贫血和黏膜黄染表现，而在其他临床症状及剖检特征上却与猪瘟极为相似，因此很容易造成误诊误治。此外，在治疗上很多常用的抗菌素和磺胺类药物本来对感染的细菌有一定的抑制作用，但却对此次感染的菌株毫无影响。由此可见，及时科学的诊断及用药对动物疫病的治愈具有决定性作用。