猪病毒性腹泻症及其防治对策

    猪传染性腹泻是一类与卫生状况及饲养管理密切相关的传染病。在养猪发达国家此类疫病已不再是主要问题，但在我国仍然是危害严重的一类传染病。此类传染病的病原主要包括病毒、细菌以及寄生虫。其中，猪病毒性腹泻的发生与流行在近年呈现持续上升的趋势，已成为造成猪场损失的最为重要的原因之一。而在猪病毒性腹泻中危害最大的是猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻以及猪轮状病毒感染。    1 猪传染性胃肠炎（TGE）与猪流行性腹泻（PED）    1.1 病原特性    TGE与PED的病原分别是猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）和猪流行性腹泻病毒（PEDV），两病毒均属冠状病毒属，从病毒的形态、大小及结构特征上无法区分TGEV与PEDV。迄今为止所有证据都表明TGEV与PEDV均只有一个血清型。据我们对近期流行的TGEV与PEDV国内分离株的主要结构蛋白基因序列测定表明，虽然两病毒的S基因及M、N基因与国外参考毒株之间的同源性存在一定的差异（94%～99%），但变异程度较为有限，尚不足以导致抗原性的显著改变。    1.2 流行特征    该病的流行一般来说有明显的季节性，多集中发生于晚秋至早春的寒冷季节，产仔旺季发生较多，我国以每年10月至次年的3月为高发期。但近年来，一些地区在盛夏季节也有发生。各种年龄、品种的猪均易感。主要有两种流行形式，在新疫区主要呈流行性发生，来势猛烈，流行期较短，而在老疫区则表现为间歇性发生。在新疫区，感染初次传入时，几乎所有的猪都可发病，大多数猪发生不同程度的厌食、呕吐和腹泻。2周龄以下仔猪死亡率很高。几乎100%，哺乳母猪常发病，表现厌食和无乳，从而进一步导致仔猪死亡率上升。在老疫区，病毒持续存在，母猪常不发病，但乳中常具有抗体，通过哺乳可使仔猪获得不同程度的被动免疫，而仔猪断奶后由于没有了母源抗体的保护，重新成为易感猪，使该病的传播延续下去。一般来说，PED的传播较TGE慢，常在4～5周内传遍整个猪场，死亡率也稍低一些，有一定的自限性，经1个月左右流行自行停息。    1.3 临床表现    1.3.1 TGE 该病潜伏期较短，约为15～18小时，有的可延长2～3日。该病传播迅速，可在数日内蔓延至全群。出现的症状依病猪年龄的不同而有差异。    哺乳仔猪：突然呕吐（多发生在哺乳之后），接着发生剧烈的水样腹泻，粪便呈黄色、淡绿色或灰白色，恶臭。病猪迅速脱水、消瘦、极度口渴，被毛粗乱无光，后躯被粪便污染。多于发病后2～5天因脱水而死亡，日龄越小病程越短，死亡率越高。    架子猪、肥育猪：突然发生水样腹泻，粪便呈灰色或茶褐色。腹泻初期，偶有呕吐，食欲不振，发病率亦可达100%，但死亡率较低，多数经3～7天后腹泻停止而康复。在腹泻期间，其增重明显减慢。    成年猪：多数不表现临床症状。部分猪表现轻度水样腹泻或一时性的软便，对体重影响不明显。    母猪：妊娠母猪的症状往往不明显或仅有轻度腹泻。但哺乳中的母猪发病后，可表现高度衰弱，食欲不振，体温升高，泌乳停止，呕吐，严重腹泻。    1.3.2 PED 初生猪发生PED，潜伏期为24～36小时，而育肥猪2天以上。PED最主要的临床症状为水样腹泻，在腹泻时也可能出现呕吐（但发生的比率一般情况下比TGE稍低），其临诊症状与TGE十分相似，但程度较TGE轻，在同窝猪群中传播的速度也比TGE慢。据安徽某猪场发生PED时的记录统计，PED首先从分娩母猪开始出现症状，其后是哺乳仔猪，随后是保育仔猪，再传至全场，发病率达100%。母猪腹泻时间较短的，其乳猪尚有可能耐过，20日龄以前的乳猪死亡率高达60%，20日龄以后的哺乳仔猪的死亡率已降至25%，而保育期的仔猪（60日龄以前）的死亡率不到10%，发病猪病程一般为3～5天，部分7～10天，康复猪约有10%成为僵猪，整个流行过程持续了近4个星期。    1.4 病理变化    TGE与PED的主要病变在胃和小肠，其他脏器均无可见的肉眼病变。    TGE的病死猪胃内充满凝乳块，胃底黏膜有时出血严重。小肠充血膨大，肠壁变薄、透亮，肠腔内充满黄绿色或灰白色液体，含有气泡和未消化的凝乳块。肠黏膜有时出血明显。而被PEDV人工感染和自然感染的仔猪，剖检仅见小肠扩张、充满黄色液体，小肠黏膜、肠系膜充血，个别试验猪小肠黏膜有轻度点状出血。    组织学检查可见，小肠绒毛萎缩变短、脱落，TGE患猪绒毛高度与隐窝深度之比从正常的7∶1缩小到1∶1，而PED患猪缩小到3∶1。    1.5 诊断    1.5.1 临床诊断 不同年龄的猪在冬春寒冷季节发生以呕吐、水样腹泻、发病率高、10～20日龄内仔猪病死率高、疾病传播迅速为特征的疫病时，可做出初步诊断。但应注意与其他可能引起以腹泻为主要症状的疫病相区别，如猪轮状病毒、猪肠道病毒、仔猪黄痢、仔猪白痢、仔猪红痢、猪痢疾、仔猪副伤寒等。由于TGE与PED在流行病学、临床症状及病理变化上都非常相似，需通过实验室诊断来确诊。    1.5.2 实验室诊断 确诊需依赖血清学和病原学诊断，常用的实验室诊断方法有病毒分离、直接免疫荧光抗体法、免疫电镜法、逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）及血清学检查。其中免疫荧光抗体法及RT-PCR应用较广，条件较好的实验室均可开展。    2 猪轮状病毒（RV）感染    轮状病毒因其在电镜下观察似车轮状而得名，它是一种以侵害婴幼儿及多种幼龄动物为主的重要肠道病原。15～45日龄的仔猪轮状病毒的感染最为普遍，可达到40%～50%，发病高峰亦在此日龄段，是仔猪白痢的主要病原之一，与大肠杆菌所引发的白痢在同一时期。成年猪对轮状病毒仍有易感性，但多呈隐性感染。    哺乳仔猪发病开始表现厌食，精神迟钝，继而出现下痢，排出的粪便呈黄白色或灰褐色，稀糊状，持续2～4天，个别猪出现呕吐。病猪消瘦，脱水。若无继发或并发感染，死亡率一般不超过5%～10%。病变主要是胃内充满凝血块和乳汁，肠黏膜呈条状或弥漫性充血，肠壁黏膜易脱落，肠壁变薄。    轮状病毒感染的实验室诊断方法主要有电镜法（EM）、免疫荧光技术（IF）、补体结合试验（CF）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、核酸聚丙烯酰胺电泳（PAGE）以及RT-PCR等。其中，ELISA、PAGE、RT-PCR、EM法常用。    3 猪病毒性腹泻的防治策略    3.1 治疗    对猪病毒性腹泻症无特效治疗方法。但为了防止继发感染和脱水，可以采取一些对症疗法。    3.1.1 补液补盐 解除酸中毒和脱水。可让仔猪自由饮服下列配方溶液：氯化钠3.5克，氯化钾1.5克，碳酸氢钠2.5克，葡萄糖20克，常水1000毫升，必要时可进行灌服或腹腔注射。    3.1.2 排毒及肠道保护 强吸附剂及肠道黏膜保护剂陶土，主要成分为双八面体蒙脱石，对消化道黏膜具有很强的覆盖能力，从质和量两方面增强黏液屏障，能吸附消化道中的气体以及病毒、细菌及其毒素等各种致病性攻击因子，并使之失去致病作用而排出体外。    3.1.3 抗菌药物 应用肠道抗菌药如恩诺沙星、硫酸新霉素、痢特灵、氟哌酸、新诺明、庆大霉素等对预防并发、继发感染有一定作用。    3.2 预防    3.2.1 综合防制技术 TGE、PED等病毒性腹泻的发生往往与猪场的管理水平尤其是卫生状况等关系密切，必须加强综合防制。避免从疫区或疫场引入带毒猪，对引进的猪要进行隔离观察和检疫。有条件的场实行“全进全出”。要做好猪群的饲养管理工作，猪舍要经常消毒，保持舍内清洁卫生，在寒冷季节应加强饲养管理，防寒保暖，不准无关人员进入猪舍。饲喂营养丰富的饲料，供给洁净的饮水等，防止犬、猫及禽鸟进入猪圈。做好这些工作可减少TGE、PED的发生。    3.2.2 免疫预防 疫苗免疫接种是目前预防TGE、PED等猪病毒性腹泻的主要手段。TGE、PED等所引起的仔猪腹泻症由于发病日龄小、发病急、病死率高，依靠自身的主动免疫往往来不及，因此现行的猪病毒性腹泻疫苗大多是给母猪预防注射，通过初乳中的特异性IgA抗体给仔猪提供良好的保护。    疫苗的种类有强毒疫苗、灭活疫苗和弱毒活疫苗等。    强毒疫苗：即用本场发病猪的肠内容物和粪便混入饲料内，对母猪尤其是妊娠母猪进行口服感染，可以使仔猪得到明显保护。但该方法容易造成母猪的粪便污染猪场环境，强毒长期存在而导致该病的反复发作，此方法应禁止使用。    灭活疫苗：安全性好，体内已有抗体（如母源抗体）对免疫效果的影响较小。免疫妊娠母猪后，产生的母源抗体对仔猪的保护性确实。灭活疫苗可在母猪分娩前20～30天肌肉或后海穴注射，仔猪通过乳汁的被动免疫而获得保护。对该病的流行区域或受威胁区域的仔猪，也可以进行主动免疫，但一般来说灭活疫苗的主要免疫效果较被动免疫稍差一些。    病毒性腹泻的免疫是以局部黏膜免疫为主。一般认为只有活病毒抗原才能刺激鼻黏膜或肠管的淋巴小结，使致敏淋巴细胞分裂增殖，产生淋巴母细胞，经淋巴流和血流聚集于乳腺，在局部产生IgA抗体，从而产生高效的免疫保护。但肌肉注射灭活疫苗亦可刺激机体在血清中产生中和抗体，其抗体类型主要是IgG，经血循环和淋巴循环进入乳腺。试验表明如果乳汁中有高水平的IgG仍可保护仔猪免受感染，但这要求肌肉注射的病毒抗原量要大。因此无论是细胞培养病毒灭活苗还是发病猪内容物组织灭活苗，其免疫效果的关键主要取决于病毒抗原含量高低。    弱毒活疫苗：由于活病毒具有激发肠道内lgA应答的能力，诱导抗体产生时间快，抗体水平高，因此一般来说，在主动免疫时弱毒疫苗的免疫效果较灭活疫苗好。但有资料显示，被动免疫时对母猪免疫接种灭活疫苗其血清及初乳中的抗体水平反而比弱毒疫苗高。在我国由于TGE与PED流行较广，猪群母源抗体水平普遍较高，因此，弱毒疫苗的主动免疫效果有时会受到限制。    3.2.3 猪轮状病毒的免疫 猪轮状病毒疫苗主要有两种类型，一是细胞灭活苗即用适应MA104细胞的低代次毒灭活后以矿物油为佐剂制备而成，另一类型是以美国Ambico公司为代表生产的弱毒苗，接种途径为口服或肌肉注射。一般认为只有接种弱毒疫苗才能完全阻止发病和排毒，而灭活苗免疫母猪可取得较好的效果。目前世界各国预防猪轮状病毒感染以弱毒苗为主，疫苗种类有美国RV弱毒苗、RV-TGEV二联弱毒苗和前苏联的三联弱毒苗。国内亦已有猪传染性胃肠炎-轮状病毒二联弱毒苗面市。但就市场反应来看，包括国外生产的疫苗，其免疫效果远远不能令人满意。有资料表明，我国猪轮状病毒存在不同的血清型，因此用单一血清型毒株制备的疫苗的免疫保护作用可能就更小。    4 结语    猪病毒性腹泻尤其是TGE、PED是给养猪场带来巨大经济损失的一类传染病，每年的冬春季节我国的大部分地区都有发生甚至流行。应用高抗原含量的优质疫苗进行合理的免疫，并配合优良的卫生、管理等综合性措施，是预防和控制TGE、PED等猪病毒性腹泻的主要途径。